Page 67 - Revista Argentina de Transfusión 3-2019

Tabla 2. Transfusiones intrauterinas
N° de Transfusiones 1° 2° 3° 4° 5°

Semana gestación 26 26.4 29 31 32
Hb pre/pos (g/dl) 3.5/9.5 9.2/14.5 9.2/- 7.8/12.9 11/15

Hto pre/pos (%) 10/28 28/40 31/- 22/39 33/42
Hidrops Si Si No No No

CONCLUSIÓN:

La primera causa de Enfermedad Hemolítica del Recién Nacido es por el sistema Rh, los cuales vienen disminuyendo
por el uso de la gamaglobulina anti D. Pero no nos debemos olvidar, de otros anticuerpos productores de enfermedad
hemolítica, que si bien no son tan frecuentes como el Rh, llegan a producir anemias severas. Por lo que debemos
realizar el control inmunohematológico a temprana edad gestacional, para poder iniciar un tratamiento oportuno y
revertir las complicaciones ocasionadas.

E-10 (AAHITC19-57)
Estudio del fenotipo D variante por métodos serológicos y de biología molecular

N Mufarrege , C Trucco Boggione , C Príncipi , M Luján Brajovich , SM Mattaloni , S García Borrás(2), MA
(1)
(1)
(1)
(1)
(1)
Ensinck , C Biondi , C Cotorruelo (1)
(2)
(2)
(1) IDICER - CONICET - UNR. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas - UNR.
(2)
Argentina.
Fundamento: El fenotipo D variante (Dvar) se caracteriza por presentar una expresión débil del antígeno D en la
membrana eritrocitaria. Esta expresión disminuída puede deberse a variaciones cualitativas (fenotipo D parcial) o
cuantitativas (fenotipo D débil) de la proteína RhD. La identificación del fenotipo Dvar resulta de suma importancia
en hemoterapia para optimizar la compatibilidad transfusional y la administración de la inmunoprofilaxis en las
embarazadas. La complejidad fenotípica del sistema Rh no puede ser resuelta, en general, mediante técnicas
serológicas convencionales. En este escenario, los estudios de biología molecular resultan fundamentales para la
determinación inequívoca del alelo responsable del fenotipo Dvar.
Objetivo: el objetivo de este trabajo fue comparar el fenotipo Dvar obtenido mediante un kit comercial de
hemaglutinación con el alelo detectado a través de técnicas de biología molecular.

Materiales y Métodos: se estudiaron 50 muestras con fenotipo Dvar. La expresión de los antígenos C, c, E y e
fue estudiada por técnicas de hemaglutinación en tubo utilizando anticuerpos monoclonales anti-C (clon MS24),
anti-c (clon MS33), anti-E (clon MS258/MS80) y anti-e (clones MS16 + MS21 + MS63). La caracterización serológica
del fenotipo Dvar fue realizada con un kit comercial que permite determinar algunos fenotipos D parciales mediante
el uso de anticuerpos monoclonales. Se obtuvo ADN genómico a través de un método de salting-out. La presencia
de variantes alélicas D débiles y los polimorfismos asociados a los 10 exones del gen RHD fueron investigados
mediante reacciones de PCR alelo-específicas. En algunos casos fueron realizados estudios de secuenciación.

Resultados: De un total de 50 muestras analizadas, sólo 3 muestras mostraron un patrón de aglutinación con el
kit comercial que se correspondió correctamente con el alelo detectado mediante el estudio de biología molecular.
De estas muestras, 2 (4%) resultaron portadoras de los alelos D parciales RHD*DV tipo 2 y 1 (2%) fue portadora del
alelo D parcial RHD*VI tipo 4. El resto de las muestras analizadas mostraron patrones de aglutinación que se
correspondían con un fenotipo DIII (n=28, 56%) y DFR (n=2, 4%) y patrones de aglutinación que no permitieron la
identificación del fenotipo (n=17, 34%). Los estudios de biología molecular mostraron que estas muestras resultaron
portadoras de los siguientes alelos: RHD*D débil tipo 1 (n=20, 40%), tipo 2 (n=18, 36%), tipo 3 (n=1, 2%), tipo 4
(n=2, 4%), tipo 59 (n=1, 2%), tipo 93 (n= 4, 8%) y RHD*325A (n=1, 2%).

E. Inmunohematología Vol. XLV / N° 3 / 2019 Asociación Argentina Pág. 259
Págs. 251 / 270 de Hemoterapia,
Inmunohematología
y Terapia Celular