Page 68 - Revista Argentina de Transfusión 3-2019

Conclusiones: Estos hallazgos revelan que la utilización de este tipo de kit sólo resulta orientadora cuando se
sospecha de un fenotipo D parcial. La elevada discordancia encontrada entre el análisis serológico y el estudio
molecular podría deberse a la incapacidad de los anticuerpos monoclonales de detectar expresiones débiles de los
epitopes D. La genotipificación RHD resulta esclarecedora del tipo de alelo responsable del fenotipo Dvar y puede
contribuir a la toma de decisiones clínicas en las transfusiones y a proporcionar recomendaciones adecuadas para
la profilaxis anti-D en las embarazadas.

E-11 (AAHITC19-60)
VARIANTES ALÉLICAS RHCE EN INDIVIDUOS CON FENOTIPO D DÉBIL TIPO 4

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C Príncipi , N Mufarrege , M Luján Brajovich , S Mattaloni , S García Borrás , MA Ensinck , C Biondi ,
(2)
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C Trucco Boggione , C Cotorruelo (2)
(1) Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Universidad Nacional de Rosario. IDICER-CONICET.
(2)
Argentina.
Fundamento: el sistema Rh es altamente polimórfico y presenta un gran interés clínico en medicina transfusional
debido a la participación de sus anticuerpos en los procesos de destrucción inmune de los glóbulos rojos. El locus
RH está constituido por los genes homólogos RHD y RHCE, dispuestos en tándem. Estos genes segregan como
haplotipos y algunos alelos RHD y RHCE muestran desequilibrio de ligamiento genético. Se han reportado más de
400 variantes alélicas que generan epitopes Rh parciales y/o débiles, fenotipos carentes de antígenos Rh de alta
prevalencia y expresión de antígenos Rh de baja incidencia. La coexistencia de variantes alélicas aberrantes en cis
en pacientes que se encuentran bajo terapia con transfusiones crónicas puede ser responsable de la producción de
aloanticuerpos complejos que conducen a reacciones hemolíticas transfusionales retardadas. Los estudios
moleculares permiten la caracterización de los alelos involucrados en la expresión alterada de los antígenos Rh,
resultando útiles para optimizar la compatibilidad transfusional.
Objetivo: el objetivo de este trabajo fue estudiar la estructura molecular del alelo RHCE en individuos portadores
de la variante alélica RHD*D débil tipo 4.

Material y Métodos: se estudiaron 32 muestras portadoras del alelo RHD*D débil tipo 4 previamente obtenidas
de pacientes no relacionados provenientes de efectores de salud de diferentes provincias de nuestro país. Se
investigó el fenotipo D por hemaglutinación con 4 reactivos monoclonales anti-D: IgM/IgG (clones TH28 / MS26),
IgM (clon MS201), IgM (clon RUM1) e IgM (clones LDM1 y ESD1M). También se estudió el fenotipo Rh completo
con anticuerpos anti-C (clone MS24), anti-c (clone MS33), anti-E (clon MS258/MS80) y anti-e (clones MS16 + MS21
+ MS63). Se obtuvo ADN genómico a través de un método de salting-out. Se utilizó una técnica de PCR-SSP para
detectar los polimorfismos c.733C y c.733G y una técnica de PCR-RFLP para detectar los SNPs c.48C y c.48G en
el gen RHCE.

Resultados: todas las muestras analizadas mostraron una expresión débil del antígeno D y portaban sólo los
antígenos c y e (fenotipo Rh completo: D débil tipo 4ccee). Los estudios de biología molecular permitieron identificar
las siguiente variantes RHCE: RHCE*ce (733C/G, 48C/G) (n=30, 93,8%), RHCE*ce (733C/G, 48G/G) (n=1, 3,1%)
y RHCE*ce (733G/G, 48C/C) (n=1, 3,1%) indicando la presencia de mutaciones responsables de alteraciones en
la expresión de antígenos codificados por el gen RHCE (c.733G y c.48C).

Conclusiones: en todas las muestras portadoras de alelo RHD*D débil tipo 4 se detectaron variantes alélicas
RHCE que generan antígenos “c” y “e” parciales, pérdida de los antígenos de alta prevalencia “hrB” y “hrS” y
presencia de los antígenos de baja prevalencia “V” y “VS”, lo que constituye una problemática a nivel transfusional
para aquellos individuos portadores de estas variantes alélilcas en homocigosis. La caracterización molecular del
haplotipo RHD-RHCE en pacientes portadores del alelo RHD*D débil tipo 4 sería de utilidad para definir la
compatibilidad transfusional y evitar la posible formación de aloanticuerpos anti-D, anti-c o anti-e, principalmente en
pacientes que tienen alelos RHCE*Ce, RHCE*cE o RHCE*ce(733G, 48C) en trans y requieren terapia transfusional
crónica para el tratamiento de su patología primaria.

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