Page 60 - Revista Argentina de Transfusión 3-2019

RESULTADOS

Se estudiaron 35 muestras de plasma obtenidos de embarazadas que se encontraban cursando las semanas 18 a
22 de gestación. Entre estas embarazadas, 12 (34,3%) cursaban su primer embarazo mientras que las 23 (65,7%)
restantes habían tenido al menos una gestación previa. La predicción del fenotipo fetal a través de la genotipificación
RhD fetal demostró que 25 (71,5%) eran portadoras de fetos RhD positivos y 10 (28,5%) de fetos RhD negativos,
de los cuales 17 (48,6%) correspondían a fetos masculinos y 18 (51,4%) a fetos femeninos. Todos los resultados
obtenidos para genotipo fetal fueron coincidentes con el fenotipo correspondiente de los neonatos.
CONCLUSIONES

Los resultados comunicados, demuestran que la genotipificación RhD fetal no invasiva mediante una técnica de
diagnóstico prenatal simple y rentable es viable de utilizarse en Argentina, permitiendo detectar y consecuente-
mente restringir el uso de IgRH a mujeres embarazadas D negativas portadoras de fetos RhD-positivos. La incor-
poración de esta prueba a los estudios de rutina de todas las mujeres embarazadas D negativas como parte de un
programa de detección prenatal, sería una buena medida para la optimización de la inmunoprofilaxis en nuestro
medio.

E-2 (AAHITC19-19)
INVESTIGACIÓN DE MARCADORES CELULARES DE ENVEJECIMIENTO ERITROCITARIO POR
CITOMETRÍA DE FLUJO

MA Ensinck
Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Universidad Nacional de Rosario. Argentina.

Fundamento: Los glóbulos rojos (GRs) han sido utilizados como un interesante y conveniente modelo para
estudiar el envejecimiento celular. Después de aproximadamente 120 días, los GRs son eliminados de la circula-
ción por las células del sistema mononuclear fagocítico mediante señales de activación o inhibición. La senescencia
eritrocitaria se asocia a una disminución en el volumen de los GRs, aumento en la densidad celular, pérdida en la
asimetría de la membrana con aumento de fosfatidilserina en la capa externa, unión de IgG autóloga y a cambios
en la expresión de diferentes proteínas. Una de las principales limitaciones en el estudio del envejecimiento
eritrocitario es la obtención de fracciones homogéneas de GRs con la misma edad.

Objetivos: El objetivo de este trabajo fue evaluar las modificaciones de distintos marcadores celulares de
senescencia eritrocitaria por citometría de flujo (CMF) en muestras de sangre entera.

Materiales y Método: Se analizaron los siguientes marcadores de superficie celular en muestras de sangre
entera: IgG, C3, fosfatidilserina, CD59, CD55 y CD47. 50 ul de suspensiones de GRs al 0.2% en PBS (n=20) se
incubaron con: anti-IgG humana-Alexa488, anti-C3APC (indirecto), Anexina VPE (AV), anti-C59FITC, anti-CD55PE,
anti-CD47PE. Luego de un lavado con PBS, las muestras se resuspendieron en diluyente para citometría. Se
utilizó un citómetro de flujo FACSAria II. Se adquirieron 100.000 eventos y se utilizó el programa FACSD iba para
adquisición y análisis.

Resultados: Teniendo en cuenta que FSC representa el tamaño celular y SSC la complejidad celular interna;
asumimos que la población de GRs Senescentes (GRSe) se encuentra en la zona de < FSC y > SSC. El % de
células IgG+ en GRSe (2.3 ± 1.4%) fue significativamente mayor que en GR Jóvenes (GRJ) (0.4% ± 0.25%) (p<0.002).
El % de células C3+ en GRSe (2.2 ± 1.4%) fue significativamente mayor que para GRJ (0.2 ± 0.55%) (p<0.0001).
El % de células AV+ en GRSe (1.77 ± 0.50%) fue significativamente mayor que para GRJ (0.21 ± 0.06%) (p <0.001).
La expresión de CD55 y CD59 evaluada a través de la intensidad de fluorescencia media (IFM) fue para CD55
en GRSe (1211.0 ± 274.34) y CD59 en GRSe (1561.6 ± 415.02) significativamente menores que CD55 para GRJ
(1395.4 ± 342.18) y CD59 para GRJ (1742.4 ± 469.98) (p<0.001). La IFM de CD47 para GRSe (11869 ± 1046.3)
fue significativamente menor que para GRJ (12963.9 ± 1117.45) (p<0.0001). La comparación de los valores
obtenidos en las poblaciones de GRSe y de GRJ para los distintos marcadores estudiados, se realizó aplicando
el test t de Student para muestras dependientes o apareadas o el de Wilcoxon (previa verificación del supuesto
de normalidad).

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