Page 44 - Revista Argentina de Transfusión 2-2019

2.6.3. Técnicas especiales para aumentar la
2.6.3. Técnicas especiales para aumentar la
2.6.3. Técnicas especiales para aumentar la
2.6.3. Técnicas especiales para aumentar la Cuando se utiliza para la separación de anticuerpos
2.6.3. Técnicas especiales para aumentar la
(11)
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(11)
reactividad
reactividad
reactividad (11) múltiples, la selección de hematíes con fenotipo apro-
reactividad
reactividad
piado es extremadamente importante para el éxito de la
✔ Variar la proporción plasma/hematíes, el tiempo de técnica.
incubación y/o la temperatura. Según los hematíes escogidos, hay dos tipos de pro-
✔ Seleccionar hematíes homocigotos para un antígeno. cesos:
✔ Utilizar potenciadores: LISS (solución de baja fuer-
Adsorción
Adsorción autóloga:autóloga:
za iónica), PEG (polietilenglicol). ✔ AdsorciónAdsorción autóloga:autóloga: se utilizan hematíes del pro-
Adsorción autóloga:
pio paciente. Sirve para casos en los que el objetivo
2.6.4. F
2.6.4. Fenotipo eritrocitario
2.6.4. Fenotipo eritrocitarioenotipo eritrocitario
2.6.4. Fenotipo eritrocitarioenotipo eritrocitario
2.6.4. F es eliminar autoanticuerpos. Únicamente se puede rea-
lizar en casos en los que el paciente no se haya trans-
Es imprescindible realizar el fenotipo eritrocitario (es- fundido recientemente y cuando hay muestra de hema-
tudio de los antígenos de los hematíes) para confirmar la tíes suficiente.
Adsorción alogénica:
sospecha de un aloanticuerpo frente a un determinado ✔ Adsorción alogénica:Adsorción alogénica: se utilizan hematíes distin-
Adsorción alogénica:
Adsorción alogénica:
antígeno. El antígeno correspondiente al aloanticuerpo tos a los del paciente. Puede utilizarse un único he-
identificado debe estar ausente en los hematíes del pa- matíe con fenotipo escogido o bien un panel de 2-3
ciente. hematíes con fenotipo complementario (adsorciones
En el caso de que el paciente haya recibido una trans- diferenciales).
fusión de hematíes reciente (en los últimos tres meses),
(13)
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(13)
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2.6.6. Técnicas de elución
hay que tener cuidado a la hora de interpretar estos resul- 2.6.6. Técnicas de elución (13)
2.6.6. Técnicas de elución
2.6.6. Técnicas de elución
2.6.6. Técnicas de elución
tados: únicamente se pueden valorar los resultados ne-
gativos. La elución consiste en liberar las moléculas de anti-
En algunos casos se requiere la utilización de reactivos cuerpo de la membrana eritrocitaria, de un modo en el
indirectos (que requieren de una técnica de antiglobulina) que el anticuerpo pueda ser posteriormente estudiado.
pudiendo dar resultados falsos positivos en pacientes Los anticuerpos fijados pueden liberarse al cambiar
con test directo de Coombs positivo. las condiciones termodinámicas de la reacción antígeno-
anticuerpo, modificando las fuerzas de atracción o alte-
(12)
(12)
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2.6.5. Técnicas de adsorción (12) rando la estructura del sitio de unión de ambos.
2.6.5. Técnicas de adsorción
2.6.5. Técnicas de adsorción
2.6.5. Técnicas de adsorción
2.6.5. Técnicas de adsorción
varios métodos
varios métodos
varios métodos
Los anticuerpos de una muestra de suero o plasma Se han descrito varios métodosvarios métodos de elución:
pueden ser eliminados tras un proceso de adsorción, uti-
lizando células portadoras del antígeno diana. Posterior- ✔ Elución por calor.
mente estos anticuerpos pueden ser recogidos por téc- ✔ Elución por congelación-descongelación (método
nicas de elución. de Lui).
✔ Elución ácida.
Las técnicas de adsorción son útiles en las siguientes ✔ Elución por solvente-detergente.
situaciones: ✔ Elución con EDTA-glicina.
✔ Elución con ácido cítrico.
1. 1. 1. 1. 1. Separación de múltiples anticuerpos presentes en
2.6.7. Técnica de neutralización
una muestra. 2.6.7. Técnica de neutralización
2.6.7. Técnica de neutralización
2.6.7. Técnica de neutralización
2.6.7. Técnica de neutralización
2. 2. 2. 2. 2. Eliminar la actividad de autoanticuerpo presente en
una muestra, para poder descartar la presencia de Se utiliza para eliminar las interferencias de la existen-
aloanticuerpos coexistentes. cia de anticuerpos que reconocen antígenos solubles en
3. 3. 3. 3. 3. Eliminar anticuerpos no deseados de una muestra, el plasma. Por ejemplo, los antígenos de los sistemas
en la preparación de reactivos. Chido y Rodgers, que forman parte del complemento y
4. 4. 4. 4. 4. Confirmar la presencia de antígenos específicos en son solubles, pueden ser neutralizados con plasma nor-
los hematíes (al ser capaces de eliminar el anticuerpo mal, evitando las interferencias de los anticuerpos anti-
correspondiente de una muestra previamente carac- Chido y anti-Rodgers.
terizada).
2.6.8. Técnicas para eliminar las interferencias de
5. 5. 5. 5. 5. Confirmar la especificidad de un anticuerpo, mos- 2.6.8. Técnicas para eliminar las interferencias de
2.6.8. Técnicas para eliminar las interferencias de
2.6.8. Técnicas para eliminar las interferencias de
2.6.8. Técnicas para eliminar las interferencias de
determinados fármacos. DTT (ver punto 3.4.2.1.)
determinados fármacos. DTT (ver punto 3.4.2.1.)
trando que puede ser adsorbido únicamente por determinados fármacos. DTT (ver punto 3.4.2.1.)
determinados fármacos. DTT (ver punto 3.4.2.1.)
determinados fármacos. DTT (ver punto 3.4.2.1.)
hematíes con un determinado fenotipo.
2.7. Procedimientos de trabajo
2.7. Procedimientos de trabajo
2.7. Procedimientos de trabajo
2.7. Procedimientos de trabajo
2.7. Procedimientos de trabajo
métodos de adsorción
métodos de adsorción
Existen diferentes métodos de adsorciónmétodos de adsorción. El proce-
métodos de adsorción
so básico consiste en poner en común un volumen de 2.7.1. Escrutinio de anticuerpos irregulares
2.7.1. Escrutinio de anticuerpos irregulares
2.7.1. Escrutinio de anticuerpos irregulares
2.7.1. Escrutinio de anticuerpos irregulares
2.7.1. Escrutinio de anticuerpos irregulares
suero/plasma y un volumen de hematíes lavados. Para
potenciar el proceso se puede aumentar la proporción de Es la prueba inicial de todo estudio de anticuerpos
hematíes, adaptar la temperatura óptima de reacción del eritrocitarios: sirve para detectar la presencia de estos
anticuerpo, tratar los hematíes con enzimas y utilizar po- anticuerpos en una muestra. Su positividad obliga a rea-
tenciadores como LISS y PEG. lizar estudios de identificación.
Pág. 128 AAHITC - Lavalleja 1214 (C1414DTZ) Vol. XLV / N° 2 / 2019 Coordinadora: Dra. León de González, Graciela
Cdad. Aut. de Bs. As. - Argentina Págs. 117 / 137 Profesora invitada: Callao Molina, Virginia
Tel/Fax: (54-11)4771-2501 - L.Rot.
E-mail: aahitc@aahitc.org.ar